(1) 검체 선별 : 오염된 동물을 검사하는 검체는 주로 수포 피부(액체), 식도 및 인두 긁어낸 채취물, 혈액 검체 등이며, 동물의 조직, 장기, 분비물 등도 검사할 수 있습니다. . 배설물 등 축산물을 검사하기 위한 시료는 육류제품, 유제품, 가죽제품 등에서 채취됩니다.
(2) 검체 수집 및 운송 원칙: 구제역 물질의 수집 및 운송은 시의적절하고 정확하며 신선하고 안전해야 합니다. 실험실 진단의 성공은 품질과 밀접한 관련이 있습니다. 받은 샘플 중. 샘플 수집 및 운송 시 준수해야 할 기본 원칙은 다음과 같습니다.
적시 샘플링: 특히 아픈 동물의 경우 샘플 수집은 시간에 매우 민감하므로 수포 단계에서 샘플링하는 것이 가장 좋습니다. 궤양이 생기고 딱지가 생기면 유효한 샘플을 수집하기가 어렵습니다.
정확한 샘플링 : 검사 목적에 따라 해당 샘플을 수집하고, 진단 증거나 참고 자료로 해당 샘플 수집을 확장할 수도 있습니다. 병원체 진단을 위해 검체를 채취할 때는 수포 피부, 수포액 등 일반적인 질병 부위에서 검체를 채취하는 것이 우선이며, 둘째로 척수, 림프절 등 독성 함량이 높은 다른 부위에서 검체를 채취합니다.
깨끗한 샘플링: 멸균 요구 사항에 따라 운영하고 모든 샘플링 장비를 멸균해야 합니다. 무균 작업이 불가능한 경우 샘플링 장소를 헹구어야 하지만 소독제로 처리할 수는 없습니다. 채취한 검체에는 적절한 항생제를 첨가해야 합니다.
충분한 샘플링: 수집된 샘플 수는 검사 요구 사항을 충족해야 하며 재검사를 위해 필요한 백업을 보관해야 합니다. 국내로 반입, 반출 및 국내 운송되는 살아있는 동물 및 축산물의 샘플링 수량은 OIE "수의학 질병 진단 및 예방접종에 관한 국제 매뉴얼(1996)"에 명시된 샘플링 수량 및 확률 원칙에 따라 수집되어야 합니다. 의심 환자의 샘플링 용량은 실험실 진단 요구 사항을 충족해야 합니다. 각 혈청 샘플은 2ml 이상이어야 하며 각 물집 피부 및 조직 샘플은 1g 이상이어야 합니다.
안전 보호: 샘플링 과정에서 샘플링 인력과 샘플링 제품에 대한 안전 보호가 제공되어야 합니다. 필요한 경우 최소한 마스크, 누출 방지 장갑, 고무 장화 및 보호 복을 착용하십시오.
샘플을 신선하게 보관하세요. 샘플의 특성에 따라 임시로 냉장보관하거나 냉동 보관할 수 있습니다. 샘플을 몇 시간 내에 실험실로 전달할 수 있는 경우에는 냉장 보관만 가능합니다. 몇 시간을 초과하면 냉동해야 합니다.
밀봉: 수집된 샘플은 운송을 위해 특수 용기에 넣어 적절하게 포장하고 밀봉한 후 냉장 보관해야 합니다. 시료를 담는 용기는 유리나 플라스틱으로 만들 수 있으며, 병, 튜브, 봉지 형태도 가능하다. 용기는 온전하고 밀봉이 용이해야 하며, 독성 액체 및 에어로졸이 누출되어 독극물을 분산시키는 것을 방지할 뿐만 아니라 외부 액체 및 가스(특히 드라이아이스에서 형성된 CO2)가 내부로 침투할 수 있도록 밀봉이 손상되지 않아야 합니다. 용기를 제거하고 바이러스를 비활성화합니다. 샘플링 전에 용기를 헹구고 건조열로 건조하거나 고압멸균해야 합니다. 각 시료 용기의 충전량은 너무 많지 않아야 하며, 특히 액체 시료는 용량의 80%를 초과해서는 안 됩니다. 비닐봉투를 사용할 경우 액체 누출을 방지하기 위해 2겹 봉지를 사용하고 밀봉기로 밀봉해야 합니다. 샘플의 물 오염. 검체를 담는 용기에 라벨을 부착해야 하며, 동파로 인해 떨어지는 것을 방지해야 합니다. 라벨에는 수집 시간, 위치, 동물종 출처, 일련번호, 검체명 등을 명확하게 표시하고 관련 역학 데이터를 첨부해야 합니다. 질병 및 사망과 같은 정보를 실험실로 전달합니다.
빠르고 안전한 배송: 테스트를 위해 샘플은 가능한 한 빨리 실험실로 배송되어야 합니다. 혈청학적 검사를 위한 냉장 검체는 24시간 이내에 실험실로 전달되어야 하며, 병원성 검사를 위한 냉장 검체는 몇 시간 이내에 실험실로 전달되어야 합니다. 운송 중에 얼었습니다. 충돌을 방지하고 원활한 운송을 유지하기 위해 각 샘플 병(백)을 올바르게 배치하십시오. 비행기로 운송할 경우 압력 변화와 샘플 손상을 방지하기 위해 샘플을 가압 창고에 보관해야 합니다. 샘플을 보낼 실험실에 미리 알려 해당 실험실이 샘플을 수락하고 가능한 한 빨리 테스트를 시작할 수 있도록 해야 합니다.
검사 기관: 구제역 바이러스의 분리 및 식별은 생물안전 3등급 실험실 또는 특수 보호 시설을 갖춘 정부 지정 실험실에서 수행되어야 합니다. 따라서 샘플 검사 부서는 자격을 갖춘 실험실이어야 합니다.
(3) 샘플 수집.
블리스터 액 채취: 멸균 주사기를 사용하여 터지지 않은 수포에서 블리스터 액을 흡입하여 블리스터 액이 맑고 투명해야 하며, 멸균된 병에 담습니다(적당량). 페니실린 1000IU/ml, 스트렙토마이신 1000μg/ml 등 항생제를 첨가할 수 있으며, 테이프로 덮어 라벨을 붙인 후 냉장고에 보관할 수 있습니다. 수포 피부는 신선, 성숙, 미파열 또는 새로 파열된 수포 피부 중에서 선택해야 합니다. .
소 검체의 경우, 혀 표면의 물집 피부는 물집이 터지지 않았거나 막 터졌을 때 채취해야 합니다. 혀 표면의 물집 피부를 채취할 수 없는 경우에는 발굽 포크와 발굽 정수리에 있는 물집 피부를 채취할 수 있습니다. 돼지 샘플의 경우 물집 피부를 수집해야 합니다. 포크, 정수리 또는 코의 물집 피부의 경우 발뒤꿈치의 각질화된 표피를 수집하지 마십시오. 물집은 일반적으로 작고 작습니다. 분산되어 있어 주의 깊게 검색해야 합니다. 수포 피부를 수집할 때는 멸균된 가위를 사용하여 수포 피부를 잘라낸 후 멸균 바이알에 넣고 동량의 글리세롤과 0.04 mol/L 인산염 완충액(PBS, pH)을 첨가합니다. 7.2~7.6) 준비된 운반용액에 적절한 양의 항생제를 첨가할 수 있습니다. 덮고 테이프로 밀봉하고 라벨을 붙인 후 -20°C에 보관하세요.
식도/인두에서 긁어낸 점막 샘플: 주로 소, 양 등 반추동물에서 구제역 감염 및 지속적인 바이러스 전염을 확인하는 데 사용됩니다. 검체 채취 시 반추동물 위의 내용물이 O/P액을 오염시키는 것을 방지하기 위해 검사 대상 동물을 12시간 전부터 금식(음용수 허용)시켰습니다. 샘플링을 위해 특수 식도 탐침컵(프로방컵)을 사용하고, 사용 전 0.2% 구연산 또는 2% 수산화나트륨 용액에 담가 소독한 후 깨끗한 물로 헹구어 사용하세요. 검체 채취 전 25ml 용량의 검체병을 준비하고, 각 검체병에 검체보존액(세포배양유지액 또는 0.04mol/L PB, pH 7.4)을 8~10ml 첨가한다. 방수 라벨을 부착하고 방수펜을 사용하여 검체의 이름, 수, 채취 장소, 동물종, 시간 등을 기재한 후, 채취한 검체는 즉시 얼음이 담긴 냉장고에 넣어 보관합니다.
혈액 샘플 수집: 혈청, 혈액 세포 및 혈액 내 기타 내용물을 포함하며 일반적으로 동물의 항체 및 면역 세포를 검출하고 동물의 면역력 및 감염 상태를 평가하는 데 사용됩니다. 혈청은 동물의 혈액 10~15ml를 멸균하여 채취한 후 혈청을 분리하여(동물당 2ml 이상) 멸균된 2개의 바이알에 넣는다. 뚜껑을 덮고 밀봉하고 라벨을 붙이고 번호를 매겨 4°C에서 보관 또는 냉동하되, 반복적으로 냉동 및 해동하지 마십시오. 그렇지 않으면 항체 역가가 감소합니다. 전혈 검체의 경우, 혈액은 멸균 조건에서 채취됩니다. 채취한 혈액 검체는 가능한 한 빨리 항응고제와 혼합하여 검사실로 보내기 전에 4°C에서 보관해야 합니다.
우유 샘플 수집: 우유 샘플을 검출함으로써 수유 동물의 구제역 감염 및 면역 상태를 파악하는 일상적인 모니터링 방법으로 사용할 수 있습니다. 유방과 유두를 세척하고 소독한 후, 처음 짜낸 젖은 버리고 다음 짜낸 젖은 무균적으로 수집합니다. 바이알에 넣고 적당량의 항생제를 첨가한다. 캡, 씰 및 라벨.
기타 샘플: 타액, 콧물, 조직 샘플, 생식관 샘플, 모피 샘플, 대변, 소변 등 포함.
(4) 검사를 위해 제출할 샘플에 대한 설명을 작성하십시오. ① 검사를 위한 단위의 이름과 위치, 샘플을 보낸 사람의 이름과 신원, 연락처, 팩스, 우편 코드, 주소 ② 의심되는 질병 ③ 검체를 제출한 이유 명칭, 동물종, 조직 및 기관의 출처, 채취시간, 위치, 일련번호, 수량 ④ 검체의 처리 및 보관조건 ⑥ 아픈 동물의 임상증상, 병리학적 해부 및 초기진단 ⑦ 목장의 사육상태, 생산상태, 면역상태, 유행병력자료 ⑧ 1차 및 2차 사례 발생시점, 동물종, 수량, 전염관계, 손실 9. 동물의 이동, 지역적으로 사육되었는지, 타지에서 사육되었는지, 언제 어디서 사육되었는지.