배지 준비는 꽃 조직 배양의 첫 번째 단계입니다. 배양 배지의 구성은 꽃의 종류, 다양한 외식편, 다양한 배양 단계에 따라 달라집니다. 일반적으로 다양한 배양 배지에는 거대 원소, 미량 원소, 비타민, 호르몬, 설탕, 한천 및 기타 물질이 포함되어 있습니다. 때로는 활성탄, 바나나 주스, 코코넛 주스 등과 같은 유기 첨가물이 배양 배지에 첨가됩니다. 생산에서는 먼저 기존 연구의 결과이자 생산 실무를 통해 검증된 기존 배양배지 조성을 선택합니다. 요즘에는 거의 모든 종류의 꽃에 대한 영양 기반 제제를 사용할 수 있으므로 추가 연구의 수고를 덜 수 있으며 생산 실무에서도 적절하게 개선할 수 있습니다. 적합한 공식을 찾을 수 없다면 먼저 MS 배지를 사용해 보십시오. MS는 1962년에 이 배지를 개발한 Murashige와 Skoog의 약어입니다. 다음은 MS 배양 배지를 예로 들어 준비 방법을 소개합니다.
(1) 모액을 준비한다. 배양액에 필요한 성분을 원액의 50배, 100배, 1,000배로 칭량하여 농축액을 만듭니다. 배양액을 조제할 때에는 원액의 비율을 측정하여 필요한 농도로 희석하여 사용한다. 모액을 준비한 후 라벨을 붙이고 0~4°C에서 냉장고에 보관하면 반년~1년 동안 사용할 수 있어 시간을 많이 절약할 수 있습니다. 화학적으로 반응하거나 용해 후 침전될 수 있는 물질은 동일한 용기에 담지 마십시오. 모액을 준비하려면 이중 증류수를 사용해야 합니다. 약물은 분석 등급 또는 더 높은 등급의 화학적 순도를 가져야 합니다. 약품의 계량과 약액의 용량이 정확해야 합니다. 모액 ① : 황산마그네슘 18.5g, 질산암모늄 82.5g, 질산칼륨 95.0g. 물을 첨가하여 1000ml로 조정하며, 농도는 배양액의 50배로 하며, 배양액 1리터를 조제할 때에는 모액 20ml를 칭량한다. 모액 ②: 염화칼슘 22.0g. 물을 첨가하여 500ml로 맞춘다. 농도는 배양액의 100배이며, 배양액 1리터를 조제할 때에는 모액 10ml를 칭량한다. 모액 ③ : 인산이수소칼륨 8.5g. 물을 첨가하여 500ml로 맞춘다. 농도는 배양액의 100배이며, 배양액 1리터를 조제할 때에는 모액 10ml를 칭량한다. 모액 ④ : 에틸렌디아민4아세트산이나트륨 3.73g, 황산제1철 2.78g. 물을 첨가하여 1000ml로 맞춘다. 농도는 배양액의 100배로 한다. 배양액 1리터를 조제할 때에는 모액 10ml를 칭량한다. 모액 ⑤: 붕산 620mg, 황산망간 2230mg, 황산아연 860mg, 황산구리 2.5mg, 요오드화칼륨 83mg, 몰리브덴산나트륨 25mg, 염화코발트 2.5mg. 물을 첨가하여 1000ml로 맞춘다. 농도는 배양액의 100배로 한다. 배양액 1리터를 조제할 때에는 모액 10ml를 칭량한다. 모액 ⑥ : 미오이노시톨 5g, 글리신 100mg, 나이아신 25mg, 피리독신염산염 25mg, 티아민염산염 5mg. 물을 첨가하여 500ml로 맞춘다. 농도는 배양액의 100배이며, 배양액 1리터를 조제할 때에는 모액 10ml를 칭량한다.
(2) 배양 배지를 준비합니다. 배양 배지 1000ml마다 응고제인 한천 6~10g의 무게를 측정한 후 수조에 천천히 녹입니다. 먼저 메스실린더에 일정량의 물을 넣고 모액의 순서와 규정량에 따라 모액을 계량한다. 모액을 첨가한 후 필요에 따라 인돌초산이나 나프탈렌초산 등의 성장조절물질을 첨가하고, 필요에 따라 배양배지 1리터당 사이토키닌을 0.04~10mg 첨가한다. 녹인 한천에 부어주세요. 배양 배지 1000ml당 또는 필요에 따라 자당 30g을 첨가하고 필요한 양으로 조정합니다. 한천이 완전히 녹을 때까지 계속 가열합니다. 염산 또는 수산화나트륨을 사용하여 배양 배지의 pH를 조정하십시오. 대부분의 배양 배지의 pH는 5.4~6.0이고, MS 배양 배지의 pH는 5.7입니다. 준비된 배양액을 뜨거울 때 배양용기에 부어주세요. 배양액은 용기 부피의 1/3~1/4 정도입니다. 배양액이 용기 벽에 닿지 않도록 하십시오. 그렇지 않으면 잡균에 쉽게 감염될 수 있습니다. 그런 다음 제때에 덮고 고압 멸균을 수행하십시오. 멸균 중에는 고압 멸균기의 작동 절차에 따라 사용하십시오. 121°C, 압력 111kPa를 15~20분 동안 유지하며 온도와 시간을 엄격하게 관리해야 합니다. 시간이 지나면 즉시 전원을 차단하고 압력솥 안의 압력이 정상압력으로 떨어지면 릴리즈 밸브를 열고 뚜껑을 열어 멸균된 배양액을 꺼내어 접종실에 넣고 배양한다. 3일 동안 감염되지 않은 후에만 사용할 수 있습니다.