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아플라톡신 B1의 검출방법

GB2761-2014 "식품 중 마이코마이신의 국가 식품 안전 기준"은 아플라톡신 B1의 기준 및 검출 방법을 수정했으며, 기타 식품은 GB5009를 준수해야 합니다. GB/T18979에 지정된 방법에 따라 테스트됩니다. TLC 방법은 아플라톡신을 측정하는 고전적인 방법이자 식품 및 사료에서 AFT 아플라톡신 B1(AFB1)을 측정하는 중국의 표준 방법 중 하나입니다(GB/T5009.23-2006). 다양한 시료에 적합한 추출 용매를 사용하여 시료로부터 AFB1을 추출하고, 용매 추출을 통해 정제한 후, 크기에 따라 AFB1의 형광 특성을 이용하여 박층 플레이트에서 크로마토그래피로 전개 및 분리하는 방식입니다. 및 형광 반점의 크기, 강점과 약점, 아플라톡신 함량의 비교 결정.

TLC에는 단일 확장 방식과 양방향 확장 방식이 있습니다. 그러나 TLC 방식은 장비가 간단하고 대중화가 용이하기 때문에 아직까지 국내외에서 사용되고 있습니다. 이 방법의 추출 및 정제 효과는 만족스럽지 않습니다. 추출 용액에 불순물이 많아 현상 중 스팟의 형광 강도에 영향을 미칩니다. 양방향 현상은 불순물의 간섭을 피하고 감도를 높이지만 작업 단계와 시간도 늘어납니다. 효소결합면역분석법으로 AFB1을 검출하는 이론적 근거는 항원-항체 반응인데, 이는 단일클론 또는 다클론 항체 기술을 사용하며 특이성이 강하고 분석 시간이 짧은 장점이 있습니다. 원리는 항원(또는 항체)이 담체 위의 면역흡착제에 흡착되고, 효소가 표지된 항체(또는 항원)를 이용하여 검체 내 시험물질(항원 또는 항체)과 특이적으로 반응하여 최종적으로 효소가 분석의 민감도를 높이는 방법을 사용하여 활성을 측정합니다. 이는 대략 두 가지 범주로 나뉩니다. 하나는 이중 항체 샌드위치 방법을 사용하여 샘플에서 AFTB1을 검출하는 것이고, 다른 하나는 경쟁 방법을 사용하여 샘플에서 AFTB1을 검출하는 것입니다. 사용의 용이성을 위해 국내외에서는 효소표지 면역흡착 분석키트 및 보조기구가 개발되어 국가표준(GB/T5009.22 1996 Second Method)에도 포함되어 있다.

그러나 ELISA법은 효소의 활성이 반응조건에 의해 쉽게 영향을 받기 때문에 ELISA법의 안정성이 떨어지고, 분석결과의 정확도가 높지 않으며, 위양성 결과가 나온다. 발생하기 쉽습니다. 일반적으로 조직의 아플라톡신 함량은 매우 낮으며 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법은 고성능 크로마토그래피보다 감도와 정확성이 더 높습니다. 오늘날 이 방법은 조직의 진균 독소 함량을 결정하는 데 거의 사용되지 않습니다. 이 방법의 검출 한계는 0.02~0.025ppb에 달합니다. 시료를 84% 메탄올 수용액으로 추출하고 n-헥산으로 탈지한 후 HLB 고상추출컬럼으로 정제하였다. 전기분무 이온화, 양이온 스캐닝, 다중 반응 검출 모드(MRM) 모니터링 및 외부 표준 정량 방법을 사용하는 이 방법은 민감도가 높고 결과를 신뢰할 수 있습니다.