OD260 은 용액 중 핵산의 농도를 반응하고, D280 은 용액 중 단백질이나 아미노산의 농도를 반응한다. 왜요?

단백질 중 Trp, Tyr, phe 의 흡광도는 280nm 이므로 280nm 은 단백질 흡광도를 나타내는 데 자주 사용됩니다. 260nm 는 DNA 의 흡광도입니다.

이론적으로 순수한 RNA 경우: OD260/OD280 의 값은 2 이고, 순수한 DNA 의 경우: OD260/OD280 의 값은 1.8.

OD260 은 용액 중 핵산의 농도를 반응하고, D280 은 용액 중 단백질이나 아미노산의 농도를 반응한다.

샘플에 단백질과 페놀이 함유되어 있다면 A260/A280 비율은 현저히 떨어질 것이다. 순수한 샘플의 경우 260 nm 의 A 값만 읽으면 함량을 계산할 수 있다. 일반적으로 A 값 1 은 50 마이크로그램 /ml 이중 나선 DNA, 40 마이크로그램 /ml 단일 체인 DNA(RNA) 또는 20 마이크로그램 /ml 과뉴클레오티드 계산에 해당합니다.

OD260/OD280=1.9~2.0 RNA 가 많아 순도가 이미 높다.

순수 DNA: od 260/od 280 ≈ 1.8 (gt; 1.9, RNA 오염이 있음을 나타냅니다. Lt; 1.6, 단백질, 페놀 등 오염이 있음을 나타냄)

순수 RNA：1.7 lt；; Od 260/od 280 lt; 2.0(2.0 시 이소 티오 시아 산이 남아 있을 수 있음을 나타냄)