돼지 역병 바이러스 (CSFV), 소 바이러스성 설사 바이러스 (BVDV) 및 국경병 (BDV) 은 모두 황바이러스에 속한다. CSFV 는 높은 치병성 및 높은 사망률 때문에 양식업에 막대한 손실을 입혔습니다. 고 치병성 균주에 감염된 돼지는 잠복기 중에 감염을 일으킬 수 있다. 급성 돼지 역병이나 아급성 돼지 역병의 임상 증상을 경험한 돼지는 증상이 나타나기 전에 대량의 해독이 있었지만, 항성돼지는 눈에 띄는 CSFV 항체 (CSFV) 이 있어 더 이상 해독을 하지 않는다. 경독주에 감염된 돼지는 만성감염으로 사망 전 장기나 간헐적으로 해독된다. 임신 암지는 태반을 통해 태아를 감염시켜 유산, 미라화, 돼지가 약하고 태아의 기형을 일으킬 수 있다. 선천적으로 저독성 바이러스에 감염된 결과 지속적인 감염을 일으킨 새끼 돼지가 면역 내성을 갖고 해독 증상을 보이지 않는다. 돼지는 또한 BVDV 또는 BDV 바이러스에 감염 될 수 있습니다. 이러한 감염은 보통 경미하고 자의적이지만 돼지 열병 바이러스와 효과적으로 구분하는 것이 중요하다.
원칙
돼지 역병 바이러스 항체 ELISA 검사 테스트 키트 (ELISA 검사) 는 돼지 혈청이나 혈장 중 돼지 역병 바이러스 항체 검사에 쓰인다. 이 테스트 키트 은 돼지 역병 바이러스 항원 이 포함된 미량 반응판 으로, ELISA 의 원리를 차단하여 돼지 혈청이나 혈장 속 돼지 역병 바이러스 항체 를 검출한다. 검사 된 샘플에서 고전 돼지 열병 바이러스가 항체 된 경우, 매운 뿌리 퍼 옥시다아제 (HRPO) 로 표시된 고전 돼지 열병 바이러스의 단일 클론 항체 (단일 클론) 를 차단합니다. 단일 복제 항체 및 돼지 열병 바이러스 항원의 결합은 매운 뿌리 과산화물 효소와 기질의 발색 정도에 의해 판단될 수 있습니다. 즉, 반응체계의 흡광도는 450nm 단파장 또는 450nm 와 620nm 쌍파장에서 측정할 수 있습니다. 검시된 샘플에 돼지 역병 바이러스 항체 (양성 결과) 이 포함되어 있으면 색이 옅어지고, 검시된 샘플에 돼지 역병 바이러스 항체 (음성 결과) 이 포함되지 않으면 색이 어두워진다. 샘플의 폐쇄율은 450nm 파장에서 샘플의 흡광도와 음성으로 대조되는 흡광도의 비율에 의해 결정될 수 있다.
시약
ELISA 반응 보드는 각각 두 개의 구멍이 있는 92 개의 샘플 또는 각각 두 개의 구멍이 있는 46 개의 알 수 없는 샘플을 감지할 수 있습니다. 이중 구멍 탐지는 검사 결과의 정확성에 도움이 된다.
1 ..? 고전 돼지 열병 바이러스 항원을 함유 한 ELISA 반응 보드
2.? 세정액 (10×)
3.? 마이너스 컨트롤
4.? 완전 제어
5.? 샘플 희석제
6.? 양 고추 냉이 퍼 옥시다아제 표지 (HRPO) 항 돼지 열병 바이러스 단일 클론 항체
7.? TMB 기판
8.? 단말기 유체
자체 소유 설비
1. 미량이동기, 50 마이크로리터 및 100 마이크로리터 .....
2. 일회용 피펫 흡입 헤드.
증류수 또는 탈 이온수.
4. 병 세척기 또는 세탁기는 보드 세척에 사용됩니다.
인큐베이터 또는 반응 보드 씰.
효소 표지.
주의할 사항
1. 사용 지침을 주의 깊게 읽고 실행을 따릅니다.
2. 테스트 키트 및 테스트 키트 내 모든 시약 2 ~ 7 C 에 보관해야 합니다.
3. 사용하지 않은 반응판은 비닐봉지에 밀봉하고 2 ~ 7 C 로 유지해야 합니다.
4. 다른 배치의 시약 또는 설명서가 혼합되어서는 안됩니다.
5. 각 시약 처리시 세균과 곰팡이에 의한 시약 오염을 방지하기 위해 조심해야 한다.
6. 만료된 시약 사용을 금지합니다.
7. 샘플과 테스트 키트 속 시약 취급 시 음식, 물, 흡연은 금지되어 있습니다.
8. 오염을 방지하기 위해 샘플마다 다른 흡두를 사용합니다.
9. 매번 검사를 할 때마다 양성대조와 음성대조를 해야 한다.
10. 각종 시약 성분을 희석할 때는 초순수만 사용할 수 있다.
1 1. 매트릭스 용액은 눈, 피부, 호흡기를 자극하므로 사용 중 눈과 피부에 닿지 않도록 해야 한다.
12. 종료액에는 강산 HCl 이 함유되어 있어 화상을 입히기 쉽다. 이런 용액을 처리할 때는 조심해야 한다.
13. 이동액관으로 액체를 빨아들일 때 입을 쓰지 마세요.
14. 이 테스트 키트 는 시험 관내 검사에만 사용됩니다.
시약 준비
가방의 마이크로판, 샘플 희석제, 양성통제, 음성통제, 효소로 표시된 제 2 항체, 기질 용액, 종료 용액은 사용하기 전에 처리할 필요가 없습니다.
세정액 (10×) 농축 세정액은 사용하기 전에 초순수 희석 10 배로 희석해야 합니다. 희석한 세정액은 4 C 에서 3 일 동안 보관하거나 1 년 동안 냉동할 수 있다. 예: 250ml? 세정액은 25ml 농축 세정액과 225ml 초순수와 충분히 혼합해야 합니다. 주의: 농축액에 결정체가 함유되어 있다면 사용하기 전에 녹여야 하고 액체는 미지근한 물로 30 분 이상 목욕해야 한다.
샘플제비
신선하고 냉장 보관 (4℃? 8 미만? 일), 냉동 혈청 또는 혈장을 검출에 사용할 수 있습니다.
조작 절차
1. 사용할 때 테스트 키트 성분을 모두 실온18 ~ 25 C 로 복원해야 합니다. 사용하기 전에 구성 요소를 실온에서 최소 1 시간 동안 배치해야 합니다.
2. 50μl 을 넣을까요? 각 검사 구멍과 제어 구멍에 샘플 희석제를 추가합니다.
3. 50μl 을 넣을까요? 양성 조절품과 음성 조절품은 해당 품질관리공에 추가되며, 오염을 막기 위해 서로 다른 조절품의 끝부분을 교체해야 한다.
4. 50μl 을 넣으시겠습니까? 나머지 테스트 구멍에 50% 의 샘플을 넣고 다른 샘플의 끝을 분리하여 오염을 방지하도록 주의하세요.
5. 미량반응판을 가볍게 튕기거나 발열기로 진동하여 반응판의 용액을 골고루 섞는다.
6. 봉인으로 미량반응판을 밀봉하거나 젖은 상자 (18 ~ 25 C) 에서 부화 2? 시간, 마이크로반응판도 봉인으로 밀봉하거나 젖은 상자에서 부화하여 밤을 지낼 수 있다.
7. 반응공 안의 액체를 빨아들여 희석된 세정액으로 씻어냅니다. 둘째, 매번 세척액으로 반응구멍을 채워야 한다는 점에 유의해야 한다. 반응구멍에 있는 세정액을 버리고 반응판을 두드립니다. 세탁기로 3 도 세탁할 수 있나요? 시간, 각 반응 구멍에 300μl 을 추가해야합니까? 세정액에 대해서. 세탁판에 주의해서 샘플 간 교차 오염을 피해야 한다.
8. 각각 100μl 을 넣을까요? 안티 CSFV? 효소표 2 항 (예비) 을 반응구멍에 넣고 봉인으로 반응판을 봉쇄하고 실온이나 젖은 상자에서 30 을 부화시키나요? 분.
9. 세판 후 (6 참조) 100μl 을 각각 추가합니까? 기질 용액을 반응구멍에 넣고 실온에서 10 에 넣을까요? 분. 첫 번째 구멍을 더하면 시간을 잴 수 있어요.
10. 각 반응 구멍에 100μl 추가? 용액을 종료하여 반응을 중지하다. 효소표 2 항이 첨가된 순서대로 종료액을 넣는 것을 주의해라.
1 1. 450nm 에서? 샘플과 대조품의 흡광도 이중 파장 (450nm) 을 통과할 수 있습니까? 그리고 620nm), 공기가 0 이 됩니다.
12. 샘플 및 품질 관리 제품의 평균 흡광도 계산 (계산 참조).
계산법
테스트된 샘플의 평균 od 450 (= od test), 양성대조의 평균 (= =ODPOS) 및 음성대조의 평균 (= =ODNEG) 을 계산합니다.
아래와 같이 시험품과 양성대조를 위한 폐쇄율을 계산하다: (양성대조의 폐쇄율 계산 방법은 동일)
ODNEG? -응? Od 테스트
차단율 =? ------? ×? 100%
ODNEG? 셋；삼；3
효도를 시험하다
음성 대조군의 평균 OD450 은 0.50 보다 커야 한다. 양성 대조군의 차단율은 50% 보다 커야 한다.
결과 판단
테스트된 샘플의 폐쇄율이 40% 보다 크거나 같으면 샘플이 양성인 것으로 판단될 수 있습니다 (CSFV 항체 존재). 테스트한 샘플의 폐쇄율이 30% 이하인 경우 해당 샘플을 음성으로 판단할 수 있습니다 (CSFV 항체 없음). 시험편의 차단률이 30% 에서 40% 사이라면 그 동물은 며칠 후에 다시 테스트를 받아야 한다.